随着检测设备的提升、各种显微技术的发展和标记手段的提高，如激光共聚焦显微镜在生物学研究中的广泛应用，使得研究者能够qy球友会、准确地观察到蛋白质在细胞内的表达情况和定位。

　　

　　通过显微镜观察荧光标记细胞内的蛋白质和分子，为生物学的研究提供了更直观的观测手段。因此免疫荧光样品的制备也成为生物学研究中的基本技术方法。

　　

　　鉴于生物体内的复杂多样性，制备免疫荧光样品的方法也存在一些差异。本文主要介绍构建绿色荧光融合蛋白表达载体，并在培养细胞中表达绿色荧光融合蛋白及免疫荧光样品的制备过程。

　　

　　将构建好的荧光表达载体进行大量扩增，并通过质粒抽提试剂盒大量纯化，得到不含有内毒素的纯化质粒。将表达载体导入到培养细胞中后，经过培养即可进行荧光蛋白的检测。而将基因导入哺乳动物培养细胞的方法有很多种，生化转染法是很常用的导入培养细胞方法。

　　

　　为了方便在激光共聚焦显微镜上观察，免疫荧光样品通常需要制备在载玻片上。培养的细胞需要在盖玻片上贴壁生长。盖玻片的厚度应小于0.17mm。购买到的盖玻片需要用玻璃洗液浸泡处理一天以上，再用去离子水冲洗掉残存的洗液。

　　

　　盖玻片经过高温灭菌处理后，放置在细胞培养皿中，用于培养细胞。对于贴壁不牢的细胞，或者与细胞外基质相关的研究，玻璃片需预先包被细胞外基质，如poly-L-Lysine，Fibronectin，Laminin等。